基因过表达的基本原理是通过人工构建在目的基因上游添加调控元件，使基因在人工控制下大量转录和翻译，从而实现基因产物的过表达。

基因过表达的步骤如下:

构建克隆并将目标基因连接到特定载体上。根据表达系统的不同，载体的类型也不同。载体中一般含有增强基因转录的启动子，不同系统使用的启动子完全不同；克隆被引入表达细胞。在大肠杆菌、酵母和哺乳动物细胞中，构建的外源质粒可以直接导入细胞。这个过程叫做转化或转染。对于昆虫表达系统，构建的质粒需要转置到杆状病毒基因组中才能用于转染。基因过表达的应用包括大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、昆虫表达系统、哺乳动物细胞表达系统和体外翻译系统。